因为标记类产品(iTRAQ、TMT)本?试剂特点,样本实际的差异倍数会有压缩现象。因此差异倍数?般在1.2,就可以说明有差异?够明显,而对于非标记类的产品如labelfree、DIA,?般差异倍数要达到1.5才能说明问题。
iTRAQ/TMT是混样上机的,数据质控是以run(即开始分的馏分)为单位分析。获得的总蛋?是所有上机样本的共有蛋?。所以没有办法再单独分析。
这主要是由于iTRAQ/TMT的技术特点所决定的。标记定量的数据分析都是基于共有蛋?进行的,特有蛋白会被过滤掉,无法进?后?数据分析,因此不能?于差异较?的物种或样本。
设置内参通道是为了保证校正不同run之间信号和仪器状态差异,减?系统误差,从?使得不同run的样本能够?起进?数据分析。mix样本是用所有需要?起进?数据分析的样本混合物。
同?批上机的样本必须是相同物种、相同组织类型才能?批上机和?起分析。搜库时是鉴定其共有蛋?,差异分析也是共有蛋?在定量值上的差异倍数FC。如果选择不同样本类型的样本,他们的特异性蛋?就会被过滤掉。
iTRAQ&TMT适?于相同组织的相对定量分析,不能进?有或?的鉴定,不能将不同的组织部位?起标记上机,更不能将不?物种的样本?起上机;对蛋?总量需求较LFQ要?,100ug以上。
蛋?质提取,出具蛋?质控报告,反馈客户,肽段酶解,多肽标记,HPLC分馏分,质谱数据采集,数据分析出具结题报告。