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Q&A

常见问题

  • 上机前会对蛋?定量吗?

    酶解后?nanodrop对肽段定量,取1μg肽段溶液上机检测。


  • High-pH RP分级的实验?的和原理?

    高pH反相?谱根据肽段的理化性质不同,通过调节流动相的极性来完成对复杂多肽样本的分离。将?个样本分离成多个馏分,分别上机检测,能够有效的提?鉴定深度,提?鉴定蛋?鉴定数量。


  • 如何判断样品样品制备结果的好坏?

    看SDS-PAGE电泳图条带丰富,分布基本均匀,清晰,蛋??量充足。同组生物重复样本,条带基本?致,没有降解,如果有高丰度条带,需要进?特殊处理。


  • 进?SDS-PAGE电泳时蛋?条带模糊的可能原因?

    实验?法原因:电泳压力太大;缓冲液配制时间过?;上样前样品加热不充分;

    样本原因:样本盐浓度太?;样本上样量太?;样本溶解不完全;样本有降解。


  • 进?样品制备时发现蛋?质降解的可能原因?

    ①样本收集过程中处理不当,如样本收集操作时间较长,没有在冰上操作。蛋?酶处于活性状态,未加?变性剂或蛋?酶抑制剂。

    ②引入了较多杂质,如发酵液引入;植物根叶清洗后没有吸收多余的水分,处理过程温度较?等。

    ③样本反复冻融。


  • 去除样本?丰度蛋白的?法有哪些?我公司采?般?什么方式去除?丰度?

    部分样本(?的?液)可以通过去除?丰富蛋?的试剂盒Proteominer去除,通过标准SDS-PAGE验证去除效果;还可以通过跑胶检测,切除?丰度条带。但可能会滤掉部分的低丰度蛋?。我们公司?般采?与样本相对应的试剂盒来去除?丰度蛋白。


  • 什么样本需要去除?丰度蛋白,为什么?

    含有?丰度蛋?样本:血液(?蛋?)、唾液(淀粉酶)、脑脊髓液(白蛋?)、卵泡液(?蛋?)、肌肉组织(肌蛋?)等通常情况下,由于质谱shotgun采集原理,?丰度蛋?会影响低丰度蛋白的检出,导致最终鉴定出来的蛋?数?(尤其是低丰度蛋白)偏少。?般情况为了还原样本的原始情况,我们不建议去除高丰度 ,而是选择非标定量?法进行分馏分上机。


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