利什曼病，由利什曼原虫引发，每年导致近百万新发病例，主要在热带和亚热带区域流行。面对目前治疗选择有限且伴随毒性与抗药性挑战的现状，针对Leishmania major M17亮氨酸氨基肽酶（LmLAP）的研究开辟了新的药物靶标前景。LmLAP在原虫的生命周期和氨基酸代谢中扮演关键角色，参与影响寄生虫的生存和复制过程中的氨基酸代谢过程，通过抑制LmLAP的活性，可以有效控制病原体，还有望为控制病原体提供有效的新治疗策略，突破现有疗法的限制。
在与被忽视的热带疾病——利什曼病的斗争中，科研人员们取得了令人振奋的新突破。2024年5月16日，英国邓迪大学Mark C Field团队在期刊ACS Infect Dis（IF=5.3）上发表了题为“Identification and Validation of Compounds Targeting Leishmania major Leucyl-Aminopeptidase M17”的研究论文，该研究利用热蛋白质组学（Thermal proteome profiling，TPP）技术，成功鉴定并验证了两种针对Leishmania major M77亮氨酸氨基肽酶（LmLAP）的化合物，展现了它们在治疗利什曼病方面的潜力。这一发现不仅为开发新的治疗方案提供了坚实的基础，也为全球抗击这一疾病带来了新的希望。
RapidFire质谱、酶活性测定、动力学分析、iTPP（等温热蛋白质组学分析）、细胞毒性评估、体内药效验证、分子对接和模拟
面对利什曼病这一全球性健康挑战，研究团队采用了RapidFire质谱法，对约6000种化合物进行了高通量筛选。这一筛选过程旨在鉴定出能够有效抑制Leishmania major M17亮氨酸氨基肽酶（LmLAP）活性的小分子。
化合物筛选
经过层层筛选，DDD00057570和DDD00097924两种化合物脱颖而出，它们不仅在体外实验中显著抑制了L. major和L. donovani内阿米巴体的生长，还展现了对LmLAP的高度选择性。分析对接确定化合物与LmLAP的相互作用，包括氢键、疏水作用和其他非共价相互作用。
分子对接确定化合物与LmLAP的相互作用
iTPP分析进一步证实了，这些化合物与LmLAP特异性结合，LmLAP的热稳定性增强。
热蛋白质组学证实化合物与LmLAP特异性结合
LmLAP过表达导致细胞周期延迟和形态异常，而化合物处理部分逆转了这些变化。
化合物逆转利LmLAP过表达引起的什曼原虫异常
DDD00057570和DDD00097924在RAW 264.7小鼠巨噬细胞和THP-1人单核细胞中表现出较低的细胞毒性，具有较好的选择性指数，确保了药物在有效治疗疾病的同时，不会对人体正常机能产生负面影响。
化合物对宿主（人）低毒性
该研究融合热蛋白质组学（TPP）等多项先进技术，为利什曼病开辟了新治疗策略，并鉴定出潜在的新药候选分子。通过精确靶向病原体特有的酶类，研究不仅揭示了开发创新药物的潜力，还为未来治疗提供了新方向。伴随药物代谢和药效学的深入研究，我们期待这些化合物将转化为治疗利什曼病的有效新药。
